Del Prueba ELISA es un examen de laboratorio médico que da como resultado la llamada reacción antígeno-anticuerpo. Se pueden probar diferentes antígenos que desempeñan un papel en la medicina humana o veterinaria. En Alemania, solo los institutos de laboratorio acreditados están encargados de realizar la prueba.
¿Qué es el procedimiento?
ELISA es la abreviatura de Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas. Por lo tanto, es un nombre en inglés, pero se ha establecido en el uso médico alemán.
La prueba ELISA es uno de los llamados métodos inmunológicos dentro de las pruebas de laboratorio médico. El procedimiento de prueba se puede utilizar para detectar moléculas de proteínas en una amplia variedad de fluidos corporales. La detección de estas moléculas permite a su vez sacar conclusiones sobre determinadas enfermedades o cuadros clínicos, por lo que los médicos también hacen que su diagnóstico dependa del resultado de dicha prueba ELISA. Por lo tanto, el procedimiento de prueba es muy importante en la práctica clínica diaria, ya sea de forma ambulatoria o hospitalaria.
Los fluidos corporales correspondientes, por ejemplo sangre total o fluidos de las articulaciones, se envían directamente al laboratorio después de que se hayan extraído del paciente. Las muestras suelen ser muy urgentes, porque el material nativo se considera sensible y debe examinarse lo antes posible. Las denominadas muestras superpuestas pueden dar lugar a resultados falsos negativos porque las proteínas patológicas a detectar se han reducido o descompuesto por completo. El llamado preanálisis juega un papel importante en ELISA; los resultados sospechosos o negativos deben repetirse nuevamente si hay síntomas clínicos.
Función, efecto y objetivos
Los tubos de ensayo y las denominadas placas de microtitulación son fundamentales para realizar una correcta prueba en un laboratorio médico acreditado. Estas placas con hendiduras finas y semicóncavas están hechas de plástico especial y cada una está recubierta con un anticuerpo específico.
Si el antígeno que se va a detectar está presente en un líquido corporal que se va a examinar, se produce una reacción antígeno-anticuerpo específica según el llamado principio de bloqueo y llave. El personal del laboratorio puede introducir el material de muestra en las placas de forma manual con pipetas o de forma totalmente automática. En los institutos de laboratorios médicos modernos solo se utilizan sistemas totalmente automatizados para realizar diagnósticos ELISA.
Sin embargo, estos deben ser monitoreados por personal capacitado, asistentes de laboratorio médico-técnico. El llamado control de calidad interno y externo también es responsabilidad del personal de laboratorio, superior al personal médico para medicina de laboratorio, epidemiología de infecciones y microbiología. Después del primer intento, es decir, después de que el material se haya pipeteado en las placas, los antígenos específicos de la muestra, si están presentes, ya se han unido a los anticuerpos de la placa de plástico.
A esto le sigue un ciclo de lavado con solución salina fisiológica para eliminar los factores disruptivos, como los antígenos o proteínas no deseados del lote. Este paso es muy importante para evitar reacciones falsas positivas. Un resultado supuestamente positivo malinterpretado por el laboratorio puede, en determinadas circunstancias, tener consecuencias fatales para el paciente. En el segundo paso de la investigación, se agrega un anticuerpo adicional, que está ligado a una enzima. Este anticuerpo marcado también se une al antígeno.
En un tercer y último paso, se agrega un colorante especial en una cantidad definida, que se descompone en mayor o menor medida por los residuos enzimáticos restantes. Sólo se puede descomponer la enzima que no se haya unido previamente al antígeno junto con el anticuerpo. La enzima libre puede escindir el tinte agregado. La cantidad exacta de tinte dividido se puede determinar con otro método de laboratorio médico, la denominada fotometría. Esto permite sacar una conclusión exacta sobre si hay antígeno presente en un material de muestra y en qué cantidad.
La prueba ELISA no solo se utiliza para el diagnóstico inicial o para corroborar diagnósticos sospechosos en determinadas enfermedades y cuadros clínicos, sino también para controlar su evolución. Si la concentración de antígeno en la prueba disminuye durante el curso de la terapia, la terapia se considera exitosa.
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La prueba ELISA es particularmente informativa a través de la detección de estructuras antigénicas en los fluidos corporales. La prueba permite una declaración denominada cualitativa, pero también semicuantitativa y cuantitativa sobre la presunta presencia de ciertos antígenos en los fluidos corporales.
No se puede usar sangre completa para el examen, solo suero sanguíneo. Por lo tanto, al igual que con otras pruebas serológicas, no es posible realizar una prueba directa en el paciente, por ejemplo a partir de la sangre capilar de la yema del dedo. En medicina humana, la prueba ELISA se utiliza principalmente para detectar antígenos en infecciones bacterianas, virales o micóticas. Además, todos los resultados positivos de la serología de la hepatitis se vuelven a comprobar con una prueba ELISA como estándar.
Ciertas hormonas, como la hormona del embarazo HCG, también se pueden determinar con la prueba ELISA. Si ocurren ciertas complicaciones durante el embarazo, el conocimiento preciso de la concentración de la hormona del embarazo en la sangre es muy útil desde el punto de vista diagnóstico y terapéutico. Otro ámbito de indicación de la prueba es la detección de las denominadas paraproteínas en la orina, tal y como aparecen, por ejemplo, en diversas enfermedades tumorales como el mieloma múltiple.
La prueba ELISA todavía se lleva a cabo en muchos institutos de laboratorio en la actualidad, pero los expertos la consideran obsoleta. La reacción inmunitaria ligada a enzimas en la prueba ELISA ha sido reemplazada cada vez más en los últimos años por anticuerpos marcados radiactivamente que proporcionan resultados cuantitativos aún mejores. Estas pruebas también se conocen como RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. Otros desarrollos específicos adicionales del ELISA son los métodos químicos de luz como la luminiscencia o la fluorescencia.
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