La evidencia de estructuras de tejidos, anticuerpos y patógenos a través del etiquetado inmunológico es popular, moderna y precisa. La inmunofluorescencia se refiere al marcaje inmunológico con anticuerpos fluorescentes preparados que se hacen brillar bajo la luz ultravioleta.
En el Detección de inmunofluorescencia directa el sustrato se examina directamente con anticuerpos luminosos, sin anticuerpos primarios ni antígenos artificiales.
¿Qué es la detección por inmunofluorescencia directa?
Los antígenos específicos de tumor en tejido tumoral se pueden detectar directamente con inmunofluorescencia. Esto permite averiguar de dónde provienen las metástasis existentes en el cuerpo.La detección por inmunofluorescencia directa es un método de diagnóstico basado en el conocimiento de inmunología, inmunotinción e inmunohistoquímica. El enfoque aquí está en la capacidad de los anticuerpos para unirse a puntos específicos en el tejido o antígenos en un suero. Estos lugares son epítopos.
En el diagnóstico bioquímico, existen anticuerpos artificiales o miméticos (singular: mimético) que permiten que estos enlaces anticuerpo-antígeno se marquen mediante fluorescencia o radioactividad. Los conjugados de anticuerpos artificiales se unen por un lado a los epítopos y por otro lado tienen un marcador fluorescente en el caso de inmunofluorescencia. Esta es una alternativa al uso de marcadores radiactivos. Lo especial de la detección directa por inmunofluorescencia en comparación con la detección indirecta es que el anticuerpo que se une al epítopo del antígeno en el material examinado también representa el anticuerpo conjugado con el marcador fluorescente. No se necesitan anticuerpos adicionales para la detección directa.
La fluoresceína, que brilla bajo luz ultravioleta, y el isotiocianato de fluoresceína (FITC) se utilizan como colorantes para fabricar conjugados de anticuerpos artificiales en inmunofluorescencia. Hasta ahora parece un poco complicado, pero la detección por inmunofluorescencia directa es un método estándar de diagnóstico de laboratorio médico para una amplia variedad de cuestiones médicas. Los anticuerpos con colorante fluorescente están listos para la venta.
Función, efecto y objetivos
La detección directa por inmunofluorescencia está disponible para exámenes de tejidos para teñir ciertas estructuras en el tejido. Pero también están disponibles para celdas individuales. La citometría de flujo juega un papel importante aquí. Finalmente, están los inmunensayos en fase sólida y líquida. Los exámenes de inmunofluorescencia de tejidos son especialmente importantes en oncología, es decir, el tratamiento médico de las enfermedades cancerosas.
Los antígenos específicos de tumor en tejido tumoral se pueden detectar directamente con inmunofluorescencia. Estos exámenes en muestras de tejido de tumores a menudo son importantes para averiguar de dónde provienen las metástasis existentes en el cuerpo o para juzgar si un tumor es benigno o maligno. El examen de células individuales con detección de inmunofluorescencia directa se utiliza para encontrar antígenos de virus, antígenos bacterianos y otros epítopos.
Por ejemplo, puede averiguar si las células están infectadas por un virus y en qué etapa del ciclo de infección se encuentran las células. El nombre FACS (= clasificación de células activadas por fluorescencia) es un método de citometría de flujo altamente eficaz en el que las células marcadas con fluorescencia se distribuyen a diferentes tubos de ensayo según el tipo de color. Este procedimiento es importante en inmunología, hematología y enfermedades infecciosas.
Los inmunensayos de inmunofluorescencia permiten la detección directa de toxinas ambientales, organismos modificados genéticamente y ciertos aditivos en los alimentos. En esta configuración experimental siempre hay una fase sólida y una líquida. También se podrían detectar directamente numerosos patógenos, incluido el virus del VIH que causa el SIDA. Sin embargo, al detectar enfermedades infecciosas y autoinmunes, a menudo se trata de detectar anticuerpos en lugar de antígenos. Estas son las moléculas de defensa formadas por el sistema inmunológico del cuerpo. Según la definición presentada aquí, tales pruebas no son pruebas directas, ya que los anticuerpos fluorescentes no se acoplan directamente a los propios antígenos del cuerpo, sino a los antígenos de la disposición de prueba.
Estos antígenos en la configuración experimental están a su vez vinculados a los propios anticuerpos del cuerpo. La detección directa por inmunofluorescencia para infecciones comunes, por ejemplo, el virus del VIH y la clamidia, solo se utiliza en pruebas especiales de detección y confirmación. Hay pruebas para muchas más enfermedades. En la mayoría de las situaciones, la detección indirecta de anticuerpos es más adecuada para enfermedades infecciosas, ya que el propio sistema inmunológico del cuerpo tiene una capacidad ingeniosa para recordar infecciones previas. En otras situaciones, la detección directa de antígenos y la detección indirecta de anticuerpos se complementan entre sí. Los últimos muestran que se ha producido una infección antes, mientras que los primeros proporcionan información más precisa sobre el estado actual de la actividad del patógeno.
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➔ Medicamentos para fortalecer las defensas y el sistema inmunológicoRiesgos, efectos secundarios y peligros
Con la detección directa por inmunofluorescencia, como con toda la evidencia médica, existen dos riesgos: el riesgo de un resultado falso positivo y el riesgo de un resultado falso negativo. Los resultados falsos y positivos provocan malestar psicológico y un gran estrés para el paciente.
Por lo tanto, se agregan procedimientos de prueba adicionales a los resultados positivos, especialmente si el diagnóstico conduce a cambios drásticos en la vida. El riesgo de un resultado negativo falso es que el paciente no se entera de la amenaza a su propia salud y quizás incluso a la salud pública a tiempo. Por lo tanto, es bueno investigar mucho y hacer y ofrecer una gran cantidad de detecciones directas de inmunofluorescencia diferentes listas para la venta. Junto con otros métodos de detección directos e indirectos de enfermedades y patologías, esto aumenta la precisión del diagnóstico.
La detección directa se basa en el anticuerpo conjugado, que por un lado se une a los epítopos de los antígenos y por otro lado también provoca la fluorescencia. Por lo tanto, dicho producto solo se utiliza en un tipo de procedimiento de prueba y no se utiliza para otros tipos de procedimiento de prueba.Ésta es una diferencia de procedimiento importante con respecto a la evidencia indirecta, en la que los anticuerpos fluorescentes están precedidos por anticuerpos primarios para la unión del epítopo. Por lo tanto, el conjugado de anticuerpos es adecuado para diferentes pruebas. Esta diferencia de procedimiento es diferente de la diferencia médica entre la detección indirecta de anticuerpos y la detección directa de antígenos.