Diagnóstico de prefertilización

los Diagnóstico de prefertilización ofrece la posibilidad de realizar pruebas genéticas de los óvulos de la mujer como parte de la fertilización in vitro (FIV). Los exámenes se llevan a cabo en los cromosomas del 1er y 2º cuerpo polar, que surgen durante la 1ª y 2ª meiosis después de la introducción de un espermatozoide masculino en el óvulo. La ventaja de este método es que de iure no es un diagnóstico preimplantacional (DGP), porque el examen se realiza antes de la fusión del núcleo femenino y masculino, por lo que el diagnóstico de prefertilización está permitido en algunos países donde está prohibido el DGP.

¿Qué es el diagnóstico de prefertilización?

Los diagnósticos de prefertilización permiten detectar aberraciones cromosómicas en el genoma haploide del óvulo femenino en el contexto de la fertilización in vitro (FIV). Sobre todo, se pueden detectar desviaciones numéricas de determinados cromosomas (aneuploidía) y anomalías de determinados genes que provocan enfermedades hereditarias. Cuando se introduce un espermatozoide masculino en el citoplasma del óvulo durante la FIV, se desencadenan la primera y la segunda meiosis (meiosis I y II) del óvulo.

La división crea dos células "superfluas", los cuerpos polares, que tienen el mismo conjunto de cromosomas que el propio óvulo. Los cuerpos polares, que normalmente serían descompuestos por el cuerpo, se toman mediante biopsia del cuerpo polar para examinar los cromosomas. Dado que los diagnósticos de prefertilización siempre se llevan a cabo en los cuerpos polares, el procedimiento también se denomina diagnóstico de cuerpos polares (PKD). La ventaja del método de examen es que también se puede llevar a cabo en algunos países donde está prohibido el diagnóstico preimplantacional (DGP), porque el examen se realiza en el genoma del óvulo cuando los núcleos celulares del espermatozoide y el óvulo aún no se han fusionado.

La desventaja es que solo se pueden examinar las aberraciones cromosómicas del genoma materno. Los cromosomas de los espermatozoides que se han introducido en el citoplasma del óvulo no se pueden detectar con este método. Las enfermedades ligadas a Y no se pueden reconocer porque el conjunto de cromosomas haploides del óvulo no puede contener un cromosoma Y.

Función, efecto y objetivos

Como parte del diagnóstico previo a la fecundación en forma de examen genético del cuerpo polar, se pueden detectar anomalías numéricas (aneuploidía) en ciertos cromosomas del genoma materno, así como translocaciones en las que los segmentos cromosómicos se han separado y reintegrado en el lugar equivocado. Además, se pueden diagnosticar mutaciones genéticas ligadas al cromosoma X que se heredan de la madre y se basan en la mutación de un solo gen (enfermedad monogénica). Esto supone que se debe conocer la posible enfermedad hereditaria para poder examinar específicamente un determinado gen en el cromosoma X.

En el caso de la herencia recesiva, existe la posibilidad de que el cromosoma X del cuerpo polar, y por lo tanto también el cromosoma X del óvulo fertilizado, contenga el alelo sano del gen correspondiente. El procedimiento en sí incluye una biopsia de cuerpo polar, en la que los dos cuerpos polares haploides se extraen del óvulo y luego los cromosomas se someten a la prueba FISH (hibridación fluorescente in situ). La biopsia de los cuerpos polares es un enorme desafío para el laboratorio que realiza el trabajo porque la identificación y aislamiento de los cuerpos polares requiere cierta experiencia. Para el procedimiento de prueba FISH, las llamadas sondas de ADN están disponibles para cromosomas seleccionados, que se conectan a los cromosomas haploides correspondientes porque tienen la secuencia de aminoácidos complementaria.

Las sondas de ADN están marcadas con diferentes colores fluorescentes, por lo que los cromosomas pueden identificarse con la ayuda de un software especial y contarse en un proceso automático. La mayoría de las aberraciones cromosómicas, como las aneuploidías y los cambios cromosómicos dentro de un cromosoma, son letales. Esto significa que la FIV no forma un cigoto, o que el embrión es rechazado después de ser trasplantado al útero, o que ocurre un aborto espontáneo temprano o tardío. Dado que la frecuencia de las aberraciones cromosómicas en los óvulos de la mujer aumenta con la edad, un objetivo importante del diagnóstico previo a la fertilización es una selección positiva de los óvulos fertilizados. Solo los óvulos fertilizados con, en la medida de lo reconocible, un genoma intacto se trasplantan nuevamente al útero.

Se dice que la selección positiva aumenta la tasa de embarazo después de la FIV y reduce la tasa de rechazo de óvulos fertilizados y el número de abortos espontáneos. Otro objetivo es excluir enfermedades hereditarias basadas en aberraciones cromosómicas o ciertos defectos genéticos en el óvulo fertilizado trasplantado desde el principio mediante la selección positiva de los óvulos fertilizados. Las enfermedades hereditarias típicas que pueden excluirse mediante la prueba son la fibrosis quística, la atrofia muscular espinal y la anemia de células falciformes.

Riesgos, efectos secundarios y peligros

Los diagnósticos de prefertilización se llevan a cabo fuera del cuerpo y, por lo tanto, no implican ningún riesgo físico adicional para la mujer en cuestión. Solo existe un riesgo bajo de lesiones físicas e infecciones asociadas con la extracción de los huevos. A diferencia del PGD, que también incluye un examen cromosómico mediante la prueba FISH, los diagnósticos previos a la fertilización solo pueden examinar el material cromosómico y genético de la madre.

Esto significa que una prueba FISH negativa, en la que no se diagnosticaron aberraciones cromosómicas o genéticas, puede despertar expectativas demasiado positivas en los padres sobre el curso del embarazo y el posterior parto. No se registran las aberraciones cromosómicas del genoma paterno y las posibles anomalías existentes del cromosoma Y, que pueden desencadenar una enfermedad hereditaria relacionada con el sexo. En este sentido, el diagnóstico de prefertilización es incluso más incompleto que el PGD, en el que se puede examinar todo el genoma del embrión en la etapa de blástula.

Sin embargo, incluso con PGD negativo, no se puede descartar que existan defectos genéticos en el genoma del embrión que pueden causar desarrollos indeseables y posiblemente deterioros después del nacimiento. La prueba FISH solo puede referirse a cromosomas y genes seleccionados.